筛靶点、构模型、做验证，找海星，做源头创新

CRISPR文库筛选

一、全程DIY一质粒方案

现货文库质粒低至890元 (100ug 细胞转染级别)

addgene进口，来源可溯

货期: 2周

二、超高性价比一病毒方案

文库病毒包装: 5980元/1mL病毒

滴度: 1E+08 TU/mL

适用范围：全基因组敲除文库A库或A+B库

2-3周交付

三、文库细胞株

300×覆盖度；NGS检测覆盖度>90%

文库细胞株低至9800元

交付: 10^6~10^7 Cells

四、文库定制  

1K文库低至18880元

6K文库低至28880元

4-8周交付，交付100 ug质粒

CRISPR-gRNA文库是高通量筛选靶基因的重要工具，可用于大规模或全基因组功能筛选，涉及信号通路、疾病、细胞药物应答、发育、基因调控等方面。海星生物在gRNA文库筛选方面拥有丰富的经验，能够帮助客户快速构建CRISPR KO（基因敲除）、CRISPRa（基因激活）文库、CRISPRi（基因抑制/沉默），也可以为客户提供全套的细胞功能筛选服务，涵括文库构建、病毒文库、细胞转染和筛选、NGS测序与数据分析服务。

CRISPR文库筛选的常规流程

500⁺成功“高分”细胞株，请致电400-990-6627 / 18626127718（微信同号）咨询。

*海星生物提供现货供应，针对Human和Mouse全基因组范围的基因敲除（CRISPR KO）gRNA文库，实现全基因范围内功能基因的高通量快速筛选。

*海星生物还可以按照需求为客户设计合成靶向特定通路或者基因的gRNA订制文库。

Nature Genetics，A genome-wide CRISPR screen identifies a restricted set of HIV host dependency factors

美怀特海德研究所、拉根研究所和布罗德研究所的研究人员利用CRISPR-Cas9基因编辑技术找出三个有望用于治疗HIV感染的新靶标。

研究者利用CRISPR敲除筛选的策略，将影响HIV感染，同时又是细胞存活非必需的基因。一共找出5个基因，其中它三个在早前的利用RNA干扰（RNAi）的研究中并未被鉴定。

作者描述：我们的研究HIV感染的主要靶标，并找出在病毒对T细胞的感染中起着最为显著性作用的宿主基因。之前的研究已找出几种宿主依赖性因子，包括HIV侵入CD4阳性T细胞所需的两种蛋白：CD4分子、CCR5，唯一被认为治愈HIV感染的一个人就是接受来自携带这种CCR5突变的供者的骨髓移植。2008年的三项利用RNAi鉴定潜在的宿主依赖性因子的研究鉴定出800多种可能的靶标；但是这些结果很少存在重叠，提示着存在较高的假阳性。

原因是：RNAi抑制但不会完全阻断基因表达，这可能允许靶基因产生足够多的蛋白来允许HIV感染，而且它也能够抑制靶基因之外的其他基因表达，从而导致假阳性结果。利用CRISPR对源自HIV敏感性的CD4阳性T细胞的一种细胞系进行筛选，研究人员鉴定出5个基因：当让它们失活时，会让细胞免受HIV感染，同时不会影响细胞存活。

A pooled, genome-wide CRISPR screen for HIV HDFs. (a) Outline of the genome-wide CRISPR screen strategy. WT, wild type; KO, knockout. (b) Flow cytometry analysis (representative of five independent experiments) of cells infected with the HIV-1 strain JR-CSF and expressing GFP as a reporter of productive HIV infection. Where indicated, cells were transduced with sgCCR5 or an sgRNA that does not target protein-coding sequences
in the human genome (nontargeting control). (c) Flow cytometry analysis (representative of three independent experiments) quantifying CD4 and CCR5 expression on the surface of wild-type GXRCas9 cells and GXRCas9 cells that were transduced with the genome-wide sgRNA library and serially infected with HIV-1 strain JR-CSF. (d) Log2-transformed fold change in the abundance of the fifth most enriched sgRNA for every gene following HIV infection. See also supplementary Figure 1 and supplementary table 1. (e) Enrichment of individual sgRNAs for three candidate HDFs and two control genes. Values indicate log2-transformed fold change in abundance following HIV infection. Values for the uninfected group are from GXRCas9 cells that were transduced with the genome-wide sgRNA library and cultured for 3 weeks.

Cas9X 海星生物可以为病毒感染筛选相关的靶向基因提供：全基因组的gRNA病毒、细胞株的构建、验证细胞株的敲除等成熟的技术支撑。